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产品名称 Biosupplies 100-5 | α-D-Mannosyl Yariv Reagent(α-D-甘露糖基 Yariv 试剂)
目录号 100-5
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100-5 2 mg 询价 咨询


α-D-Mannosyl Yariv Reagent(α-D-甘露糖基 Yariv 试剂)--100-5

β- 葡萄糖基亚里夫试剂化学全称:1,3,5 - 三 (4-β-D - 吡喃葡萄糖氧基苯基偶氮)-2,4,6 - 三羟基苯,属于红色染料。该染料可特异性结合并沉淀一类植物蛋白 —— 阿拉伯半乳聚糖蛋白(AGP)。应用场景包括:

--组织化学染色:用于组织切片中阿拉伯半乳聚糖蛋白(AGP)的定位检测(Anderson 等人,1977;Gleeson & Clarke,1979)。

--提取物定量检测:测定植物组织提取液内 AGP 含量(Van Holst & Clarke,1985)。

--交叉电泳分离:依据电荷差异实现 AGP 组分分离(Van Holst & Clarke,1986)。


操作使用方法

(一)组织化学染色法

称取 2 mg β- 葡萄糖基亚里夫试剂,溶于 1 mL 0.15 mol/L 氯化钠溶液;

室温下将染液覆盖组织切片,孵育 1 h,明场显微镜观察;

试剂与 AGP 结合形成红色沉淀显色,显色区间为棕红色至亮红色,颜色深浅随组织类型变化。

注意事项:AGP 多为水溶性,常规包埋流程易造成蛋白流失,建议优先采用徒手切片或冷冻切片;实验需设置对照,使用 α- 半乳糖基亚里夫试剂做空白对照。

(二)定量检测(径向扩散法)

配制凝胶工作液:1%(w/v)琼脂糖、0.15 mol/L NaCl、0.02%(w/v)叠氮化钠、10 μg/mL β- 葡萄糖基亚里夫试剂。

溶液加热煮沸溶解琼脂糖,分装 3.5 mL 至预热 5×7 cm 玻璃板,冷却凝固;

凝胶打孔,加入待测样品;

以阿拉伯树胶(gum arabic)为标准品,参照 Van Holst & Clarke(1985)方法绘制标准曲线。

(三)交叉电泳实验

配制电泳凝胶液:1%(w/v)琼脂糖溶于 0.025 mol/L Tris-0.2 mol/L 甘氨酸缓冲液,添加 0.02%(w/v)叠氮化钠、30 mg/mL β- 葡萄糖基亚里夫试剂;加热溶解琼脂糖,参照 Van Holst & Clarke(1986)开展交叉电泳实验。

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